Pembalap Italia Marco Bezzecchi menunjukkan performa luar biasa dalam sesi latihan bebas pertama Grand Prix Italia dengan mencatatkan waktu nol yang sama dengan Pedro Acosta. Meskipun demikian, Acosta berada di posisi kedua karena catatan waktunya sedikit lebih lambat. Sementara itu, Brad Binder hanya tertinggal 0,053 detik dari dua besar, membuat pembalap Ducati harus puas di posisi tiga. Marc Marquez juga tampil impresif dengan berada di urutan keempat hanya selisih 0,094 detik dari posisi terdepan Bezzecchi.
Mayoritas pembalap memilih menggunakan ban depan lunak dan ban belakang medium, kecuali Fabio Quartararo, Bezzecchi, dan Acosta yang beralih ke ban belakang keras. Selain itu, Bezzecchi menggunakan set aerodinamika baru yang dihomologasi oleh Aprilia setelah pengujian di Aragón. Sedangkan Francesco Bagnaia memasang fairing baru yang juga diuji di Motorland. Di tengah sesi yang penuh tantangan, Bezzecchi mengalami sedikit kekacauan dengan beberapa kali keluar lintasan, namun tetap menghadirkan performa terbaiknya.
Ditutup dengan kondisi panas dan suhu lintasan mendekati 50 derajat, sesi latihan ini juga menyaksikan beberapa kecelakaan di luar lintasan. Raul Fernandez terjatuh di awal sesi di Trackhouse, sementara Márquez, Quartararo, Acosta, dan Pecco mengalami insiden saat menabrak kubah Ducatinya di sudut tikungan. Fabio Di Giannantonio menempati posisi kelima tercepat diikuti oleh Quartararo dan Maverick Viñales. Sedangkan Francesco Bagnaia harus puas di posisi kedelapan. Johan Zarco menjadi pembalap Honda terdepan di urutan kesepuluh, sementara Joan Mir menutup 20 besar. Keseluruhan, sesi latihan berlangsung penuh persaingan dan ketegangan dalam memperebutkan posisi terbaik.